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病菌 PCR 分型診斷方法 第2部分:產(chǎn)氣莢膜梭菌 PCR 分型檢測(cè)方法

Method of PCR typing diagnosis for bacterial Part2:Method of PCR typing detection for Clostridium perfringens
標(biāo)準(zhǔn)號(hào):DB21/T 2734.2-2017
基本信息
標(biāo)準(zhǔn)號(hào):DB21/T 2734.2-2017
發(fā)布時(shí)間:2017-02-23
實(shí)施時(shí)間:2017-03-23
首發(fā)日期:
起草人:趙鳳菊、顧貴波、關(guān)淼、楊本勇、于長(zhǎng)泳、李井春、馬建山、魏園園、梁?jiǎn)?、張雷、鄭付華、王欣、鄧文超、王竹
標(biāo)準(zhǔn)分類: 動(dòng)物檢疫、獸醫(yī)與疫病防治
ICS分類:獸醫(yī)學(xué)
提出單位:遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心
起草單位:遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、遼寧省動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究院
歸口單位:遼寧省畜牧獸醫(yī)局
發(fā)布部門:遼寧省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局
主管部門:遼寧省畜牧獸醫(yī)局
標(biāo)準(zhǔn)簡(jiǎn)介
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了產(chǎn)氣莢膜梭菌A、B、C、D、E 五型PCR檢測(cè)方法的技術(shù)要求。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于產(chǎn)氣莢膜梭菌病的診斷、監(jiān)測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查,適用于動(dòng)物糞便、腸內(nèi)容物及純培養(yǎng)物中產(chǎn)氣莢膜梭菌α-毒素、β-毒素、ε-毒素和ι-毒素基因的PCR檢測(cè)。 本標(biāo)準(zhǔn)中的試驗(yàn)操作應(yīng)在生物安全Ⅱ級(jí)(BSL-2)以上的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。
標(biāo)準(zhǔn)摘要
標(biāo)準(zhǔn)《病菌 PCR 分型診斷方法》按照 GB/T 1.1-2009 給出的規(guī)則起草。 標(biāo)準(zhǔn)《病菌 PCR 分型診斷方法》分為兩個(gè)部分: ——第 1 部分:大腸桿菌 PCR 檢測(cè)方法; ——第 2 部分:產(chǎn)氣莢膜梭菌 PCR 分型檢測(cè)方法。 本部分為病菌 PCR 分型診斷方法的第 2 部分。 本分由遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提出。 本標(biāo)準(zhǔn)由遼寧省畜牧獸醫(yī)局歸口。 本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:遼寧省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、遼寧省動(dòng)物醫(yī)學(xué)研究院。 本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:趙鳳菊、顧貴波、關(guān)淼、楊本勇、于長(zhǎng)泳、李井春、馬建山、魏園園、梁?jiǎn)?、張雷、鄭付華、王欣、鄧文超、王竹。 |
標(biāo)準(zhǔn)目錄
前言II 1范圍1 2規(guī)范性引用文件1 3縮略語1 4原理1 5儀器和器材1 6試劑和引物1 61試劑2 62引物2 7操作步驟2 71樣品的采集、前處理、存放與運(yùn)輸2 711采樣注意事項(xiàng)2 712采樣工具2 713腸內(nèi)容物的采集與前處理2 714糞便的采集與前處理3 715產(chǎn)氣莢膜梭菌純培養(yǎng)物3 716存放與運(yùn)送3 72PCR檢測(cè)3 721DNA提取3 722PCR3 7222電泳PCR反應(yīng)條件4 7223電泳4 8試驗(yàn)成立的條件4 9結(jié)果判定4 附錄A(規(guī)范性附錄)試劑配制5 A1電泳緩沖液(50倍)5 A1105mol/L乙二銨四乙酸二鈉(EDTA)溶液(Ph80)5 A12TAE(三羥甲基氨基甲烷一乙酸)電泳緩沖液(50倍)5 A21%瓊脂糖凝膠5 |
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